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低吸附離心管的一些關鍵點,看完這些讓你不踩坑!
更新時間:2021-12-20瀏覽:2675次
  低吸附離心管常用于對蛋白質進行濃縮和除鹽操作,對色譜洗液和生理梯度片斷進行緩沖液交換或者除鹽操作,從細胞的細菌培養(yǎng)上清液或者溶菌液中回收生物分子。清洗和濃縮乳膠懸浮液,離心管通常不需要預處理即可使用,不過對于蛋白質樣本處理,特別是較稀的蛋白溶液來說,用膜濃縮,回收率常常是不定量的,雖然PES材料使非特異性吸附最小化,但是,某些蛋白,特別是稀的時候會有問題,非特異性結合的程度隨著個別蛋白結構的不同而不同,含有帶電的或者疏水結構的蛋白質更易于不可逆結合到不同表面。
 
  低吸附離心管離心時注意事項:避免過長時間或者高速離心,雖然我們產(chǎn)品有防死端設計,可避免過度離心造成膜表面干燥而造成不可逆吸附,避免過度濃縮,終體積越小,越容易因表面吸附而損失得率,離心后采用輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時補加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附,能提高回收率,盡量避免TIPS接觸膜表面。
 
  對于低吸附離心管表面做鈍化預處理可降低蛋白質在膜表面的吸附性損失,大多數(shù)情況下,在濃縮稀釋蛋白溶液之前預處理柱子可以提高回收率,因為溶液可填滿膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點,鈍化的方法是預先用高容積的鈍化溶液預浸泡柱子一小時以上,蒸餾水*沖洗柱子,再用蒸餾水離心一次以*除去可能殘留在膜上的鈍化溶液,注意鈍化處理后別讓膜干了,如果要留待以后使用,需要加無菌蒸餾水保持膜濕潤。
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